内容提要
与其他肿瘤相比，胶质母细胞瘤(GBM)极难治疗。近年来，光热疗法(PTT)已显示出先进的治疗效果;然而，由于激光的组织穿透效率相对较低，其在深部肿瘤中的应用仍然具有挑战性。本文合成了缓激肽(BK)聚集诱导发射纳米粒子(BK@AIE NPs);这些提供选择性穿透血液肿瘤屏障(BTB)和强吸收在近红外区域(NIR)。通过T1加权磁共振和荧光成像证实，BK配体可以促进BTB腺苷受体激活，增强肿瘤内的运输和积累。BK@AIE NPs在980 nm近红外激光照射下具有较高的光热转换效率，有利于深部肿瘤的治疗。可有效抑制肿瘤进展，延长小鼠时空PTT后的生存期。近红外辐射可以根除肿瘤组织，释放肿瘤相关抗原。作者观察到，PTT治疗GBM小鼠，激活了GBM区域的自然杀伤细胞、CD3+ T细胞、CD8+ T细胞和M1巨噬细胞，提高了治疗效果。这项研究表明，NIR辅助的BK@AIE NPs代表了一种有希望的策略，可以改善系统性消除GBMs和激活局部脑免疫特权。
结果与讨论
BBT-C6T-DPA(OMe)的合成路线。结构和表征结果如图所示。与分子内旋转相比，BBT-C6T-DPA(OMe)小分子的分子内键伸缩振动对外部环境约束的敏感性较低，这为改善NPs内部的产热提供了相当大的优势。为了进一步研究形态水平上的光热特性，作者使用两亲共聚物(DSPE-PEG2000羧酸)作为掺杂基质，通过纳米沉淀法合成了AIE NPs。此外，基质提供了理想的血液循环时间和良好的胶体稳定性。为了增加BTB的通透性并靶向GBM细胞，通过1-乙基3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)/ n -羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联将BK负载在AIE NP表面。bk修饰的表面增强了NPs的细胞摄取，改善了治疗效果。zeta电位的变化证实BK已成功加载到AIE NPs表面。
稳定性在BK@ AIE NPs的生物医学应用中很重要。发现BK@AIE NPs在各种生理溶液中没有絮凝沉淀。同时，BK@AIE NPs溶解在这些生理溶液中，在储存14天后，其平均尺寸和zeta电位均未发生变化，稳定性极佳。透射电子显微镜(TEM)和动态光散射(DLS)发现BK@AIE NPs呈现出直径约为100 nm的均匀球形形貌。对BK@AIE NPs进行了不同的电子衍射光谱(EDS)成像。在单个BK@AIE NPs中，S、N和P元素分布均匀，表明AIEgens已成功组装。
作者评估了BK@AIE NPs的三个特性来评估其用于PTT的可行性:i)近红外区域的吸收特性，ii)光稳定性，以及iii)光热转换(PC)效率。在BK@AIE NPs的紫外-可见光谱中，在紫外和近红外区域可以看到两个不同的峰。有趣的是，在近红外区观察到一个宽的吸收峰，其最大值约为980 nm;这表明它在NIR-II PTT上有很好的适用性。显然，NP浓度的变化(从30µg mL−1到120µg mL−1)增加了测量的吸收强度。本文选择了一种市售且兼容的980 nm连续激光器，研究了BK@AIE NPs在不同浓度和激光功率下的NIR-II光热效应。在980 nm激光照射和BK@AIE NP浓度增加的情况下，BK@AIE NP溶液的温度急剧升高。BK@AIE NP溶液(120µg mL−1)辐照5 min后温度升高31.3℃;同时，水组温度升高3.2℃。BK@AIE NP悬浮液记录温度随激光功率的变化曲线。5 min后BK@ AIE NP温度快速升高，发现0.72W cm−2激光功率可以实现56.4±2.1°C的合适局部温度。
此外，还对BK@AIE NPs的光热稳定性进行了评价。经过5个周期的近红外辐照后，BK@ AIE NPs的PC性能没有明显变化;同时，对于游离吲哚菁绿(ICG)，在5个循环中温度逐渐降低，表明作者开发的BK@AIE NPs具有较强的光热稳定性。
为了验证980 nm激光相对于808 nm激光在PTT中的优势，通过对不同组织的照射来评估其穿透能力。在相同的组织厚度下，980 nm激光的穿透深度明显高于808 nm激光。例如，对于3 mm的鸡组织，980 nm的激光能量保留了≈41%，而808 nm的激光仅保留了≈28%。激光穿过小鼠颅骨和头皮的穿透率。在小鼠颅骨组，980 nm激光处理组(85%)比808 nm激光处理组(78%)保留了更多的光能。同样，通过将小鼠颅骨与头皮结合，用980纳米激光处理的组织(48%)比808纳米激光处理组(31%)损失的光能少。因此，这些数据表明980 nm PTT治疗脑肿瘤更有效。
众所周知，主动靶向可以有效地提高纳米级制剂在给药过程中的靶向能力。B1R是一种可诱导的原型GPCR，可调节脑肿瘤中血管的通透性。因此，B1R作为炎性肿瘤细胞中AIE NPs的特异性生物标志物被研究。作者检测了B1R在U87-MG细胞系和正常人星形胶质细胞中的表达。免疫荧光分析显示，U87-MG细胞中的B1R蛋白信号明显高于正常人星形胶质细胞。为了验证体外BK@AIE NP靶向效率，选择花青素-5.5 (cy5.5)修饰BK@AIE NPs，通过EDC/NHS偶联监测摄取。荧光显微镜观察BK@AIE NPs摄取情况，Image J软件进行定量数据分析。结果显示，U87-MG细胞对BK@AIE NPs的摄取显著增加。这些结果表明BK@AIE NPs通过BK和B1R的相互作用特异性识别U87-MG细胞。同样，基于BJ的NPs可以在体内有效地靶向U87-MG肿瘤，而不是先前研究报道的正常人类星形胶质细胞。
NPs在细胞内传递到靶点是决定其在生物医学上潜在应用的关键因素。因此，为了进一步监测BK@ AIE NPs在癌细胞中的位置，作者使用LysoTracker生物标志物和4 '，6-二氨基-2-苯基吲哚培养的U87-MG细胞进行了共定位分析。BK@AIE NPs用cy5.5标记，内酶/溶酶体用LysoTracker Green染料染色。细胞孵卵4小时后，最原始的AIE NPs仍留在溶酶体内，如激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)合并图像中的黄点(重叠的红绿点)所示。相比之下，在分析过程中共定位减少，这表明BK@AIE NPs主要积聚在U87-MG细胞的溶酶体中。利用LSCM评价BK@AIE NPs的细胞内化效率，并利用Image J软件分析荧光信号。BK@AIE NPs的细胞摄取效率在很大程度上依赖于B1R介导的内吞途径。cy5.5发出的红色荧光在BK@AIE NP组中更强烈，说明BK@AIE NP在U87-MG细胞中有更高的细胞摄取。同时，AIE NPs处理后荧光信号减弱。这些结果表明BK@AIE NP基团不仅加速了NPs从溶酶体的逃逸，而且提高了内化效率。
与许多其他指标一样，线粒体功能障碍已被确定为细胞凋亡的功能标记。因此，在进一步评价体外光热治疗效果之前，作者先检测BK@ AIE NPs在980 nm激光照射下对U87-MG细胞产生的线粒体功能障碍。采用JC-1染色获得的线粒体膜电位(MMP)监测损伤情况。
MMP的减少总是响应于JC-1单体的聚集(绿色荧光)，而JC-1的聚集(红色荧光)响应于高MMP，这表明标准状态。此外，JC-1的荧光从橙色到绿色的转变表明发生了早期凋亡。不同处理组的JC-1近似聚集(红色荧光)表明细胞MMP的变化可以忽略不计，线粒体的损伤也不明显。然而，BK@AIE NP + 980 nm激光组绿色荧光的急剧增加表明线粒体被破坏。因此，作者得出结论，BK@AIE NP + 980 nm激光治疗产生的局部热疗可以解释线粒体功能障碍，这意味着该系统可以通过靶向PTT结果和增强细胞凋亡来激发有效的抗肿瘤过程。
近年来，免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death, ICD)被用来描述免疫原性细胞凋亡和主动免疫反应的状态。ICD的一个特征是在大面积损伤后钙调蛋白(CRT)表面暴露增加。因此，CRT暴露作为一个吞噬呼叫信号，引发内部免疫反应。因此，作者进一步研究了BK@ AIE NP + NIR-II激光入路对GBM细胞的PTT作用。免疫荧光分析显示，只有BK@AIE NP +激光照射组CRT水平升高，说明其光热效果良好。这些结果表明BK@AIE NP-based PTT可以诱导U87-MG细胞凋亡，同时促进损伤相关分子模式的释放。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-酰基)-2,5-二苯基- 2h -溴化四唑(MTT)测定、钙黄素-乙酰氧基甲基(AM)/碘化丙啶(PI)染色和肿瘤球形成证实BK@AIE NPs的体外抗肿瘤效果。通过增加BK@AIE NP浓度和激光功率强度，发现BK@AIE NP处理的细胞存活率显著降低。而U87-MG细胞在无激光照射的情况下孵育24 h对细胞活力的影响最小。为了研究PTT在体外的作用，采用绿发射calceinAM和红发射PI染色分别区分活细胞和死细胞。在980 nm光照射5 min时，随着BK@AIE NP浓度和激光功率强度的增加，绿色荧光减弱。用120µg mL−1 BK@AIE NPs在980 nm激光照射下(5 min, 0.72Wcm−2)。接下来，作者用不同浓度的BK@AIE NPs孵育GBM细胞，在980 nm激光照射(5 min, 0.72Wcm−2)。BK@AIE NPs处理U87-MG细胞强烈抑制其形成肿瘤球的能力。这些结果表明BK@AIE NP组不仅实现了杀伤癌细胞的功能，而且还能抑制肿瘤复发。
通过构建U87-MG/人血管内皮细胞(HUVEC)共培养模型，评估了BTB的渗透能力，这是药物递送最具挑战性的天然障碍之一。HUVECs与U87-MG细胞共存时表现出血管生成特征。在模拟BTB的顶室中加入AIE NPs和BK@AIE NPs。通过检测24 h内不同时间将NPs添加到顶室后基室的荧光强度，定量评估有BK和不含BK的AIE NPs的激动剂介导的动态渗透。BK@AIE NPs的穿越效率随BTB渗透率的变化而变化。作者在治疗后24小时内监测AIE和BK@AIE NPs的BTB穿越效率。BK@AIE NPs具有较高的杂交效率，是AIE NPs的5.3倍。结果表明，上调BTB的通透性可提高BK@AIE NPs的通过率。
此外，在基底室共培养的正常人星形胶质细胞存在的情况下，作者评估了NIR-II激光对U87-MG细胞的特异性靶向性以及对BK@AIE NPs的杀伤作用。作为对照实验，作者也用BK@AIE NPs孵育U87-MG细胞和正常人星形胶质细胞。BK@ AIE np处理的U87-MG细胞暴露于激光照射下，细胞损失约98%，显著高于正常人星形胶质细胞(约49%)。有趣的是，在正常人星形胶质细胞/U87-MG混合组中，正常人星形胶质细胞的数量保持健康。这些结果表明，有了一个有效的癌细胞靶向分子，PTT可以作为一种精确的策略来治疗GBM，同时对邻近组织的损伤最小。
溶血率作为标准参数进行评估，以支持BK@AIE NPs的可用血液相容性，这是进一步生物应用的标准。在一种可用且安全的治疗剂中，溶血率应低于5%，以避免血红蛋白释放和血栓形成。不同浓度下BK@AIE NPs的溶血率区域在1.02% ~ 1.45%之间变化，对溶血没有影响。值得注意的是，纳米材料与红细胞(rbc)相互作用后的形态变化是评估其血液相容性的另一个重要因素。红细胞的破碎或聚集表明纳米材料的不相容性。在这里，作者提供了红细胞正常和受损形态的样本。用磷酸盐缓冲盐水(PBS)孵育的红细胞作为阴性对照，用水孵育的红细胞作为阳性对照。与阴性对照类似，BK@AIE NP孵育组的红细胞保留了正常的圆形形态，而没有发生任何形态破坏。此外，U87-MG、正常人星形胶质细胞和HeLa细胞用不同浓度的BK@AIE NPs孵育。
BK@AIE NPs在这些细胞系中表现出生物安全性，即使浓度高达120µg mL−1。当BK@AIE NPs浓度达到120µg mL−1时，U87-MG、正常人星形胶质细胞和HeLa细胞形态正常。作者证明BK@AIE NPs具有良好的生物相容性。
为了充分发展恶性GBM的PTT治疗，作者必须克服BTB的限制，促进治疗过程。B1R是自发引入作者的系统的，因为有报道称它通过改变血管的渗透性来调节脑肿瘤的微观结构。通过western blot分析，作者发现U87-MG肿瘤组织中B1R蛋白水平高于正常组织。正常脑组织的B1R水平可以忽略不计。因此，作者通过监测溴化乙啶(EB)的渗透性，研究了BK@ AIE NPs在体内暂时调节BTB渗透性的能力。EB外渗表明血清白蛋白从血管外渗，两者稳定地相互作用。小鼠在注射EB之前静脉注射AIE NPs或BK@AIE NPs。6 h后，分离小鼠脑，进行组织学分析。作者发现BK@AIE NP处理显著增强了BTB的通透性，导致EB血管渗透，EB在肿瘤间质内分布更加均匀。作者还注意到AIE NPs和PBS治疗并没有增强EB血管渗透或改善其分布。这些结果表明，只有BK@AIE NPs处理才能改善BTB的通透性。这可能与B1R激动剂([des-Arg]缓激肽)在脑肿瘤区域与其受体的结合有关。这种相互作用通过激发一组二次反应和相关蛋白在跨细胞或细胞旁途径的表达来增加BTB的通透性。
在作者目前和以前的研究中，作者发现离子络合产生的钆(Gd3+)离子锚定在NPs上可以为磁共振(MR)成像提供强烈的对比。正如预期的那样，体外研究显示BK@ AIE NP样品治疗后具有浓度依赖性的增亮效果，这为其在t1加权MR成像中的潜在应用提供了支持。在U87-MG荷瘤小鼠体内静脉注射AIE NPs和BK@AIE NPs后，在体内MR成像中发现肿瘤区域明显变亮，这是由于系统给药后NPs在肿瘤中积累较多。作者观察到BK@AIE NP组的MR信号大约高出两倍，这为BK在体内穿越BTB发挥关键作用提供了明确的证据。AIE NP组与BK@AIE NP组相比，通过增强渗透性和滞留性(EPR)效应，MR信号增强。磁共振成像(MRI)方法显示了感兴趣区域的定量分析。
接下来，作者通过静脉注射在原位U87-MG荷瘤小鼠模型中评估BK@AIE NPs在体内的活性交叉能力。BK@AIE NP组荧光信号越高，说明BK的靶向能力较好，对BK@AIE NPs和AIE NPs在脑内积累的定量分析如图所示。值得注意的是，在24小时后，BK@AIE NP治疗组肿瘤中的平均信号增加了近三倍。这些结果验证了BK@AIE NP显著增强BTB渗透和肿瘤积聚的假设。此外，作者研究了BK@AIE NPs在动物体内的行为。延长NPs在血液中的循环对于提高穿透肿瘤的可能性和肿瘤中的积聚是必不可少的。BK@AIE NPs静脉注射到u87 - mg -胶质瘤小鼠。为了进一步验证纳米颗粒增加血管的通透性并穿过BTB，作者使用生物透射电镜来评估大脑血管的内部结构。与AIE NP组相比，作者观察到BK和BK@AIE NP组的血管组织相对疏松。正如预期的那样，BK@AIE NPs集中在细胞间隙。此外，在注射后24小时内，检测不同时间血液中BK@AIE NPs的行为。尽管总体上呈逐渐下降的趋势，但在24小时后，观察到它们仍保持在相当高的水平。
接下来，作者评估了使用BK@AIE NPs在常规异种移植肿瘤小鼠中进行PTT的可行性。将U87-MG细胞接种于雄性BALB/c裸鼠右腋下，作为常规异种移植瘤模型。使用红外热像仪记录肿瘤部位的局部温度，以证明PTT与AIE NPs相比具有更高的容量。同时，结合的BK诱导更多的AIE NPs聚集在肿瘤部位;这具有高温效应，在NIR-II暴露5分钟下，观察到局部肿瘤温度为52.8°C;AIE NP组温度≈49℃。这些观察结果表明，BK@ AIE NPs可以成功靶向脑肿瘤细胞。为了进一步评估PTT效率，在预定时间静脉注射BK@AIE NPs、AIE NPs和PBS。24h后，980 nm激光(0。用wcm−2)照射肿瘤部位5min，评估激光照射对肿瘤增殖的影响。单独使用NIR-II激光照射不能抑制肿瘤。记录不同处理下的肿瘤体积;结果显示，NIR-II激光的个体PTT效应可以抑制肿瘤生长。然而，BK@AIE NP + NIR-II激光组的下降更为显著，这也反映在18天的肿瘤体积测量中。
对各治疗组的肿瘤组织进行组织学分析，加深对治疗效果的认识。BK@AIE NP-和PTT处理组苏木精和伊红(H&E)染色的肿瘤切片显示出明显的细胞质渗漏和凋亡细胞核萎缩。作为一种可用的治疗药物，BK@AIE NPs的生物安全性也必须进行评估。记录各组患者治疗过程中体重作为评估指标;这些代表了小鼠的副作用程度。各组小鼠的体重在18天后略有增加，表明有一个健康的生命周期。主要器官的H&E染色分析与上述结果一致，因为没有组出现坏死或形态改变。血常规检查也证实了这一结果，各组生理活动均保持正常。总之，作者证明了合成的BK@AIE NPs没有明显的体内毒性。
此外，通过将胶质瘤261 (GL261)细胞接种到雌性C57BL/6J小鼠纹状体中构建原位脑肿瘤模型，评估BK@AIE NPs的体内治疗效果。通过对比患者和小鼠的病理切片，验证肿瘤模型的成功建立。患者的肿瘤组织与小鼠相似。作者进一步检测了B1R在肿瘤组织中的表达水平，发现其在GL261肿瘤组织样本中的表达水平明显高于正常组织样本。正常脑组织的B1R水平可以忽略不计。用不同的溶液处理原位胶质母细胞瘤小鼠，然后用激光照射(980 nm, 0。通过记录肿瘤部位的温度，作者证实仅BK@AIE NP +激光治疗组的温度升高>15°C。以AIE NP +激光组和PBS +激光组为对照，每组10例。组织学染色进一步证实了BK@ AIE NP +激光组的高治疗效果，肿瘤细胞凋亡最高，增殖减少。此外，在H&E和刚果红染色结果中也发现BK@AIE NP +激光治疗具有较强的杀瘤能力，几乎整个肿瘤组织消失;这与末端脱氧核苷酸转移酶dUTP镍端标记(TUNEL)染色的肿瘤边缘分析一致。强绿色荧光是由于肿瘤组织中凋亡细胞的增加而产生的，而正常组织周围的细胞保持正常，证实PTT对健康细胞造成的损伤最小。测定不同处理下GBM小鼠的生存时间，评价其抗胶质瘤效果(图S21)。BK@ AIE NP +激光组的中位生存时间为48天，与PBS +激光(25天)和AIE NP +激光(30天)治疗相比，BK@ AIE NP +激光治疗显著延长了动物生存时间。这些结果表明bk偶联AIE NPs具有良好的治疗效果，可以作为一种有前途的胶质瘤治疗药物传递系统。因此，ptt诱导的死亡癌细胞释放肿瘤来源的抗原，可以刺激宿主免疫系统，产生急性炎症和白细胞浸润肿瘤，以及激发T细胞，M1 MΦ和NK细胞。奥沙利铂通常用于诱导小鼠结直肠癌模型的ICD。收集PTT后小鼠终点附近的脑肿瘤，进一步研究局部免疫反应。流式细胞术检测CD3+ T细胞、CD8+ T细胞、CD4+ T细胞、M1 MΦ和NK细胞。在接受BK@ AIE NP +激光治疗的小鼠中，肿瘤中所有细胞的浸润CD3+ T细胞、CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的百分比急剧增加。有趣的是，AIE NP +激光治疗增加了肿瘤中浸润性CD3+ T和CD8+ T细胞的数量(与CD4+ T细胞相比)。脑免疫的激活有助于M1、MΦ和NK细胞的显著生长。特别是M1 MΦ-generated诱导型一氧化氮合酶(iNOS)产生了杀肿瘤作用。因此，使用不同处理后的肿瘤切片对抗肿瘤标志物iNOS进行免疫组织化学分析。与AIE NP +激光或PBS +激光治疗相比，BK@AIE NP +激光治疗后M1 MΦ标记iNOS信号明显增加。此外，与PBS +激光和AIE NP +激光治疗相比，BK@AIE NP +激光治疗后NK细胞(被称为“肿瘤杀手”)也分别增加。
由于免疫系统被激活，在BK@AIE NP +激光治疗后，与AIE NP +激光或PBS +激光治疗相比，血清中一系列具有代表性的T细胞细胞因子(包括IL-2、IL-10、IL-12、IL-1β (IL =白细胞介素)、IFNγ (IFN =干扰素)和TNFa (TNF =肿瘤坏死因子)显著增加。一般来说，IL-1β、IL-12、IFNγ和TNFα构成t -辅助性1 (Th1)应答，而IL-10构成t -辅助性2 (Th2)应答。IL-2的分泌刺激T淋巴细胞和b淋巴细胞活性，提高杀瘤免疫，激活小胶质细胞，调节调节性T细胞(Tregs)。IFNγ促进细胞毒性免疫应答，IFNγ主要由CD4+和CD8+ T细胞和NK细胞产生。小胶质细胞分泌的IL-12在自我刺激过程中激活NK细胞并刺激T细胞。IL-10是一种具有抗血管生成特性的多功能免疫细胞因子。
细胞因子如TNFα可以刺激细胞介导的体液免疫反应，最终抑制肿瘤增殖。BK@AIE NPs作为一种局部PTT，也通过三种途径增强抗肿瘤免疫。首先，使用AIE NPs的PTT可以促进趋化因子和细胞因子的产生，从而刺激全身免疫反应，发挥抗肿瘤活性。PTT治疗后促炎细胞因子显著增加，诱发急性炎症，提示先天免疫反应被激活。第二，发现PTT诱导中枢神经系统，从而激活免疫系统。第三，使用BK@AIE NPs的PTT通过坏死和凋亡两种方式杀死GBM细胞。死亡的肿瘤细胞随后被先天免疫效应细胞吞噬，这些细胞可以特异性地向T细胞呈递肿瘤来源的抗原肽，并刺激相应的T细胞反应。
在化疗和放疗的标准治疗中，肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)具有固有的难治性，并在疾病传播的关键方面发挥作用，包括原发性肿瘤扩张和肿瘤转移。目前切除这一关键亚群的挑战可归因于肿瘤复发。幸运的是，热介导的癌症治疗是CSCs消融的一个有吸引力的选择。为了确认干细胞对BK@AIE NPs的PTT敏感，用流式细胞术分析存活部分。正如预期的那样，PBS +激光治疗对CD133+细胞亚群没有显著影响。与PBS +激光治疗相比，AIE NPs +激光治疗降低了CD133+细胞亚群的平均百分比。然而，BK@AIE NPs +激光治疗显著降低了细胞亚群的百分比。这些结果表明BK@AIE np介导的热疗可以作为一种消除干细胞和大块脑癌细胞的先进疗法。
结论
作者开发了一种基于BK包被AIE NPs的多功能生物相容性纳米平台，它可以:i)特异性靶向脑肿瘤，ii)穿透BTB, iii)实现PTT, iv)同时激活局部免疫系统以有效协同治疗脑癌。体内双峰荧光和MRI证实了BK@AIE NPs在肿瘤中的显著积聚。使用BK@AIE NPs的PTT体内肿瘤抑制作用是通过系统给药动物肿瘤模型实现的。凭借这些优势(例如，暂时调节BTB的渗透性)，GBM细胞可以被特异性靶向，并且可以在对周围正常组织伤害最小的情况下实现脑肿瘤局部温度的快速升高。在体内，BK@AIE NP介导的PTT在消除肿瘤细胞(在局部微环境中释放抗原)和刺激炎症反应(将免疫细胞招募到该区域)方面均显示出显著作用。BK@AIE因此，np介导的PTT是激活大脑免疫系统的合适工具。此外，BK@AIE NP介导的PTT可以消除小鼠模型中建立的肿瘤内的CSCs，这是常规治疗相关癌症复发的根本原因;因此，它促进了癌症治疗的高度增强疗效。未来，为了促进BK@AIE NPs的临床应用，作者将仔细优化合成化学和制造工艺，以使纳米药物的关键质量特征(如粒径、粒径分布、电荷和AIE封装)得到很好的控制。此外，作者将在大型动物(如猪)中进行临床前疗效和安全性研究，以更好地预测患者的反应变异性和治疗效果。
参考文献
Upregulating Aggregation-Induced-Emission Nanoparticles with Blood–Tumor-Barrier Permeability for Precise Photothermal Eradication of Brain Tumors and Induction of Local Immune Responses. Ming Zhang, Wentao Wang, Mohsen Mohammadniaei, Tao Zheng, Qicheng Zhang, Jon Ashley, Shunjie Liu, Yi Sun, Ben Zhong Tang. Adv. Mater. 2021, 33, 2008802. https://doi.org/10.1002/adma.202008802
