内容摘要
跟踪肿瘤的免疫微环境对于了解癌症免疫治疗效果背后的机制是至关重要的。肿瘤侵袭性白细胞(TIL)的分子成像可用于非侵入性监测肿瘤免疫微环境，但目前的显像剂不能将TIL与其他组织中的白细胞区分开来。在这里，作者报道了一个可激活的分子探针库，通过近红外荧光，在体内实时成像特定的TIL(包括M1巨噬细胞，细胞毒性T淋巴细胞和中性粒细胞)，也可以通过排泄的尿液，由于探针的肾脏清除。只有在肿瘤和白细胞生物标记物同时存在的情况下，探针的荧光才会被激活，这使得能够对小鼠癌症模型中的特异性TIL群体进行成像，其敏感性和特异性类似于通过活组织活检的FOW细胞仪分析获得的结果。作者还表明，这些探针能够非侵入性地评估不同肿瘤的免疫原性，动态监测免疫治疗的反应，并准确预测不同治疗下的肿瘤生长。
结果与讨论
合成及体外检测。通过以下三个步骤在近红外半花青染料(CyOH)上构建夯实。首先，丙氨酸(Ala)，即可被肿瘤生物标记物(丙氨酸氨基肽酶，也称为氨基肽酶N(APN))切割的多肽底物，通过自焚连接物连接到CyOH上，生成CyA。然后，将用于M1巨噬细胞的caspase-1(Cas-1)可裂解肽底物N-乙酰-Tyr-Val-Ala-Asp-OH(YVAD)、用于CTL的颗粒酶B(GRB)可裂解肽底物N-乙酰基-Ile-Glu-Phe-Asp-OH(IEFD)和用于中性粒细胞的中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)可裂解肽底物N-甲氧基琥珀酰丙氨酸-Pro-Val-OH(AAPV)26分别连接到CyA上，得到TASMPM1、TASMPCTL和TASMPNE。对于TASMPM1，将一氧化氮(NO)可裂解的底物邻苯二胺连接到YVAD的羧基侧链上，以增强对M1巨噬细胞的特异性。最后，用炔基官能化的PVP键合TAMP前驱体的叠氮基团，得到TAMPS。确定PVP具有比聚乙二醇高的肿瘤蓄积效率(1.5倍)和更长的循环半衰期(4.4倍)后，选择PVP作为肿瘤被动靶向成分。
TAMPM1、TAMPCTL和TAMPNE都表现出相似的光学性质，其吸收峰位于~610 nm和660 nm，并且最初是非荧光的。只有在肿瘤和各自的淋巴细胞生物标志物存在的情况下，TAMPS在610 nm的吸收才会下降，在~680 nm出现一个新的峰，归属于未老化的CyOHP；此外，~710 nm的荧光随着孵育时间的延长而逐渐增加，并在2 h后显示出12-26倍的增强。相比之下，与任一单一生物标志物孵育后，均未发生吸收和荧光变化。更重要的是，TAMPS和TASMPs的荧光强度在与其他干扰酶孵育后表现出可忽略的增强，证实了高特异性。
应用高效液相色谱(HPLC)分析了TASMP(TAMP前体物)对其各自生物标志物的结构变化。TASMPs代替TAMPS用于研究，因为由于PVP的存在主导了洗脱性能，所以TASMPs在酶活化前后的高效液相色谱图谱保持相似。TASMPs与肿瘤和淋巴细胞生物标记物孵育后，出现了分配给CyOH的洗脱峰(TR = 17.8Min，高效液相保留时间)，而与任何单一生物标记物孵育后都无法检测到该峰。测定了CaS-1、GrB和NE对它们各自的TASMP的催化效率(kcat/Km)分别为0.003、0.002和0.49 μM−1 s−1，其中kcat表示催化速率常数，Km表示酶的米氏常数。肿瘤生物标记物APN进一步切割TASMPs的产物CyA，计算出APN对CyA的催化效率为0.03 μM−1 s−1。
在肿瘤生物标记物(APN)存在或不存在的情况下，TAMPS检测TIL的能力与相应的白细胞进行比较。APN与恶性肿瘤侵袭和肿瘤血管生成密切相关。注意，在此时间内，所有的TAMPS及其荧光对应物(PVP-Cy)对各自的细胞的细胞毒性可以忽略不计。当在没有APN的情况下与各种白细胞孵育时，TAMPS显示的荧光信号可以忽略不计。只有在APN存在的情况下，目标白细胞才能启动TAMPS信号，APN的存在比非特异性白细胞或在白细胞生物标志物抑制剂存在的情况下高7到40倍。此外，TAMPNE在N2中性粒细胞中的荧光比NAIVE和N1中性粒细胞高约5.4倍。此外，在APN存在的情况下，TAMPS及其相应的针对白细胞的染料标记抗体在从其目标白细胞发出最大荧光的选定细胞中显示出类似的强度趋势。经简单的线性回归模型评估后，发现活化的TAMPS与其相应的染料标记抗体之间存在正相关，相关系数(R)为0.96-0.99，皮尔逊相关系数(ρ)为0.98-0.99。这些数据进一步证明，TAMPS的荧光激活既需要肿瘤生物标志物，也需要淋巴细胞生物标志物，从而确保它们对TIL的特异性。
TAMPs对TILs的体内特异性。由于外周血和炎症组织中存在白细胞，因此开发对TIL具有高度特异性的显像剂仍然具有挑战性。研究了TIL的特异性，并与单锁对应物(AMP)进行了比较。将生理盐水或脂多糖(LPS)处理的小鼠的血液样本与这些探针孵育，进行NIRF成像。与在磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶液中的纯形式相比，TAMPS在生理盐水处理的血液样本中显示出几乎相同的NIRF信号，在内毒素炎症的血液样本中显示的信号略有增加(1.1-1.2倍)。相反，与PBS中的NIRF信号相比，生理盐水处理和内毒素致炎的血液样本中的AMP信号分别高出1.8-3.6倍和2.8-4.9倍。AMPS在血液样本中在680 nm处的较高吸收强度进一步证实了AMPS的激活，是TAMPS的1.7%到2.5%。
在左大腿肌肉中有内毒素炎症组织32和右侧面有CT26皮下肿瘤的活小鼠中，进一步验证了TIL的TILs的特异性。在内毒素诱导的炎症后，白细胞在治疗后第一天迅速被招募到炎症部位。局部注射TAMPS或AMP显示出信号增加，在注射这些探针后30 分钟达到最大值，在脂多糖炎症和肿瘤组织。因此，在注射探针后30 分钟，将脂多糖炎症组织和CT26肿瘤组织中的探针信号与这些探针在皮肤中的背景信号进行比较。仅在肿瘤组织中观察到明显的信号增强(3.6倍至4.2倍)，而在内毒素炎症组织中未观察到显著的信号增强(1.1倍至1.6倍)；相反，在内毒素炎症组织和肿瘤组织(3.1-到4.2倍)都检测到AMPs。此外，当4T1或CT26肿瘤被APN抑制剂Bestatin预处理时，肿瘤部位的TAMPS信号减少，仅比皮肤背景高1.1至1.2倍，进一步证明肿瘤生物标记物对于TAMPS激活是必不可少的。
为了确定TAMPs的清除途径和体内稳定性，收集了注射TAMPs或AMPs的健康小鼠的尿液，并用高效液相色谱法进行了定量。由于它们的高水溶性，这些探针在注射后24 小时的肾脏清除效率是总注射剂量的55-71%。在PBS中，排出的尿液中的TAMPs信号与其纯形式的信号一样低，表明TAMPs在全身循环和排泄过程中具有很高的体内稳定性。相反，排泄的AMP的信号比PBS中的信号高1.6到1.8倍，排泄的TAMP显示出与PBS中完整探针相似的吸收曲线。这些数据证实，双重锁定的TAMPs可以最大限度地减少循环中白细胞的非特异性激活。
免疫原性低的肿瘤中TIL的实时成像。TAMPs用于体内TIL实时成像的能力首先在携带4T1肿瘤的小鼠身上得到验证，4T1肿瘤被认为是免疫原性较差的肿瘤，因为它们显示出较低的肿瘤抑制白细胞。小鼠被给予抗程序性死亡配体1(APDL1)、奥沙利铂(Oxa)或联合用药(APDL1/Oxa)。Oxa是第三代铂类药物，已知通过诱导免疫原性细胞死亡(ICD)激活树突状细胞(DC)和改善T细胞渗透来抑制癌症生长。为了抑制免疫检查点抑制(ICI)和增强针对癌细胞的获得性免疫反应，作者使用了apd-L1来抑制程序性死亡配体1(PD-L1)与T细胞上表达的程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)受体的结合。
TAMPs和‘Always On’参比探针(PVP-IR800)静脉联合注射到4T1荷瘤小鼠体内，在三轮免疫治疗后进行纵向NIRF成像。肿瘤区域的近红外荧光信号逐渐增加，并在注射探针后24 h达到最大值，而PVP-IR800的近红外荧光信号在注入探针后2 h达到最大值。因此，在注射探针后24 h，比较不同治疗组的肿瘤信号。为了排除TAMPs浓度差对肿瘤检测信号的贡献，定义了TAMPs与PVP-IR800的比值信号，命名为R-NIRFM1、R-NIRFCTL和R-NIRFNE。结果表明，经APDL1/Oxa处理的小鼠的R-NIRFM1最高，分别是APDL1、Oxa和未处理小鼠的1.1、1.2和1.5倍。而经ADC-L1/OXA处理的小鼠R-NIRFCTL也最高，分别是APDL1处理、OXA处理和未处理小鼠的1.3、1.4和1.5倍。与之相反，用APDL1/Oxa处理的小鼠的R-NIRFNE最低，分别比APDL1处理、Oxa处理和未处理的小鼠低1.1、1.1和1.2倍。这些数据表明，TAMPM1和TAMPCTL的活性最高，而TAMPNE的活性最低。
免疫荧光染色显示，超过75%的TILs的红色信号与用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗体标记的TIL的绿色信号很好地重叠；此外，由TILs和TILs标记的双阳性细胞约占各自TILs的55%。流式细胞仪显示，在APD-L1/OXA处理的小鼠肿瘤中iNOS+Cas-1+细胞的水平最高，分别是雪崩-L1处理组、Oxa处理组和未处理组的2.1、2.6和3.5倍。结果表明，经ADC-L1/OXA治疗的小鼠肿瘤中CD8+GRB+细胞水平最高，分别是APDL1、Oxa和未治疗小鼠的1.6倍、1.6倍和3.4倍。与之形成鲜明对比的是，经ADC-L1/Oxa治疗的小鼠肿瘤中Ly-6G+NE+细胞水平最低，分别是APDL1治疗组、Oxa治疗组和未治疗组的1.9、1.8和2.9倍。在淋巴结和外周血中也发现了类似的白细胞趋势。这些数据证实了TAMPS的激活位置是针对TIL的，并且它们的信号与流式细胞术有很好的相关性。
用简单线性回归模型进一步评价TILs与TAMPs信号的相关性。R-NIRFCTL和R-NIRFNE分别与CD8+GrB+细胞和Ly-6G+NE+细胞(RCTL = 0.74、ρCTL = 0.86、RNE = 0.84和ρNE = 0.92)呈正相关。此外，TIL的比例进一步被描述为CD45+细胞的比例显示，APD-L1/OXA治疗组有最多的CTL(5.3%)和M1巨噬细胞(20.0%)，但最小的中性粒细胞(15.6%)。此外，与各自TIL的比例和绝对数量有很好的相关性(R NIRF≥0.47，ρ ≥ 0.69)。这些数据证实R-NIRF对于非侵入性和实时的TIL在4T1肿瘤中是有效的。
TILs在高免疫原性肿瘤中的实时成像。TAMPS用于在体内实时成像TILs的能力被进一步与携带CT26肿瘤模型的小鼠进行评估，CT26肿瘤模型被认为是一种高免疫原性肿瘤，因为它显示出更高的肿瘤抑制白细胞34。小鼠经腹膜腔注射apd-L1、抗分化簇47(ACD47)或apd-L1与aCD47的组合(apd-L1/aCD47)，然后全身注射TAMPS和PVP-IR800。ACD47已被广泛用于阻断肿瘤表面CD47与髓系细胞(包括巨噬细胞和DC)膜上过度表达的信号调节蛋白α(SIRPα)之间的相互作用。
在三轮免疫治疗后，TAMPS和‘Always On’参比探针(PVP-IR800)静脉共同注射到活着的小鼠体内进行纵向NIRF成像。TAMPS和PVP-IR800在肿瘤区域的近红外信号分别在注射探针后24 h和2 h达到最大值。因此，在注射探针24 h后，比较不同处理组的肿瘤R-NIR。经apd-L1/aCD47处理的小鼠R-NIRFM1最高，分别是apd-L1处理、aCD47处理和未处理小鼠的1.3、1.1和1.4倍。Ad-L1/aCD47组小鼠的R-NIRFCTL最高，分别是Ad-L1组、aCD47组和未处理组小鼠的1.1、1.4和1.9倍。与之相反，用apd-L1/aCD47处理的小鼠的R-NIRFNE是最低的，比apd-L1处理、aCD47处理和未处理的小鼠分别低1.3、1.2和1.9倍。TAMPM1和TAMPCTL活性最高，而TAMPNE活性最低。
肿瘤切片的免疫荧光染色显示，TILs的红色信号与FITC标记抗体标记的TIL的绿色信号重叠良好。双阳性细胞占TAMPS定位细胞的80%-92%，占相应TIL的70%-91%。流式细胞仪检测结果显示，apd-L1/aCD47处理组小鼠肿瘤中iNOS+Cas-1+细胞水平最高，分别是apd-L1处理组、aCD47处理组和未处理组小鼠的1.6、1.3和1.7倍。结果表明，在apd-L1/aCD47处理组小鼠的肿瘤中CD8+GRB+细胞水平最高，分别是apd-L1处理组、aCD47处理组和未处理组小鼠的1.1倍、1.1倍和1.3倍，而Ly-6G+NE+细胞水平最低，分别是apd-L1处理组、aCD47处理组和未处理组小鼠的1.6、2.3和3.0倍。淋巴结和外周血中的白细胞表现出类似的趋势。这些数据证实了TAMPS的激活位置是TIL特异的，并且它们的信号与流式细胞术有很好的相关性。
用简单线性回归模型进一步评价TILs与TAMPS信号的相关性。R-NIRFM1与肿瘤区域iNOS+Cas-1+细胞水平呈正相关(Rm1 = 为0.84，ρM1 = 为0.92)。R-NIRFCTL和R-NIRFNE分别与CD8+GrB+细胞和Ly-6G+NE+细胞水平呈正相关(RCTL = 0.95，ρCTL = 0.98，RNE = 0.83，ρNE = 0.91)。此外，TIL按CD45+细胞的比例进行了分析，结果表明，雪崩-L1/aCD47处理组的CTL(21.8%)和M1巨噬细胞(26.5%)数量最多，但中性粒细胞数量最少(8.9%)。此外，R-NIR与TIL的比例和绝对数量有很好的相关性。这些结果进一步证实了R-NIR对于CT26肿瘤的非侵袭性和实时TIL是有效的。
联合免疫治疗的疗效预测。评价了不同治疗方法对4T1和CT26荷瘤小鼠的治疗效果。对于4T1荷瘤小鼠，最高的肿瘤控制率(85%)被观察到是APD-L1/OXA治疗，分别比雪崩-L1(8.6%)和OXA(48%)治疗高9.9倍和1.8倍()。此外，经雪崩毒素治疗的小鼠存活率达83%，远高于单纯雪崩毒素组(17%)和奥沙组(50%)。注意，所有未经治疗的小鼠在第28天死亡。APDL1/Oxa治疗的高疗效归因于OXA诱导ICD的产生和促进向觉醒的CTL递呈抗原的协同作用。当CTL募集到那个时间时，apd-L1抑制了PD-L1与PD-1的结合，而有利于CTL对癌细胞的细胞毒作用。同时，激活的CTL产生细胞毒性细胞因子，进一步促进M1巨噬细胞的极化，并抑制免疫抑制的驻留中性粒细胞，导致有效地杀死癌细胞。对于CT26荷瘤小鼠，apd-L1/aCD47治疗组的肿瘤控制率最高(82%)，分别是apd-L1组(71%)和aCD47组(62%)的1.2倍和1.3倍。经apd-L1/aCD47处理的小鼠存活率达100%，高于apd-L1(83%)和aCD47(50%)。请注意，所有未经处理的小鼠都在第32天死亡。ACD47抑制CD47-SIRPα的相互作用，促进巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用，从而进一步增强CTL的启动作用。同时，APDL1有利于CTL的细胞毒作用，并提供一个免疫刺激微环境，抑制免疫抑制中性粒细胞的功能，从而增强抗癌效果。
为了评估TAMPS用于尿液分析的可能性，采集了注射探针后小鼠的尿样进行NIRF测定。总体而言，尿信号与实时成像数据很好地吻合：对于apd-L1/oxa治疗的4T1荷瘤小鼠，尿液R-NIRFM1和R-NIRFCTL最高，而R-NIRFNE最低；对于apd-L1/aCD47治疗的CT26荷瘤小鼠，尿液R-NIRFM1和R-NIRFCTL最高，而R-NIRFNE最低。所有的尿R-NIR都准确地反映了它们各自TIL的种群。为了确定第7天的尿R-NIR是否能预测第20天的治疗结果，对R-NIR与相对肿瘤体积进行了相关性分析。与体内比率成像数据一致的是，4T1和CT26荷瘤小鼠的尿中R-NIRFM1与相对肿瘤体积呈负相关，R值分别为0.89和0.74，ρ值分别为−0.94和−0.86。此外，尿R-NIRFCTL与相对肿瘤体积呈负相关(4T1模型：RCTL = 0.83，ρCTL = −0.91；CT26模型：RCTL = 0.75，ρCTL = −0.87)。4T1模型：RNE = 为0.92，ρNE = 为0.96；CT26模型为RNE = 为0.89，ρNE = 为0.94。这表明M1巨噬细胞和CTL是积极的预后指标，而中性粒细胞是治疗结果的负面预后指标，这与先前的临床研究结果38-40一致。由于尿检是在第7天进行的，比治疗终点早2 周，因此TAMPS的尿液R-NIR可作为一种非侵入性的准确方法来预测治疗结果。此外，对不同肿瘤的尿R-NIR进行比较发现，TAMPM1和TAMPCTL在CT26肿瘤中的R-NIR分别是4T1肿瘤的1.3倍和1.5倍。因此，TAMPM1和TAMPCTL清楚地区分了免疫原性低的肿瘤(4T1)和免疫原性高的肿瘤(CT26)，显示了它们的分层能力。
通过主成分分析(PCA)进一步评估TAMPS在辅助诊断和预测癌症免疫治疗结果中的能力。夯实的R-NIR的主成分分析清楚地分离了未经处理的4T1和CT26肿瘤。针对不同肿瘤模型的TAMP的接收器工作特性(ROC)分析显示，TAMPM1、TAMPCTL和TAMPNE的曲线下面积(AUC0.98和0.53)，而TAMPS的组合更好地区分了CT26肿瘤的4T1(AUC = 1.00)。TAMPS的R-NIRF的PCA进一步显著地分离了雪崩-L1治疗的4T1和CT26肿瘤。对APDL1处理的4T1和CT26肿瘤的TAMP的ROC分析表明，TAMPM1、TAMPCTL和TAMPNE的AUC值分别为0.81、0.93和0.96，并且TAMPS的组合更好地区分了APDL1处理的4T1和APDL1处理的CT26肿瘤(AUC = 1.00)。这一结果与先前的数据一致，即CT26肿瘤对ICI显示出有效的反应，而4T1肿瘤对ICI41几乎没有反应。TAMPS的PCA进一步显著地区分了不同治疗组中的荷瘤小鼠。此外，多个夯实组合的ROC分析以高精度区分未经治疗的肿瘤和已治疗的肿瘤(AUC4T1 = 0.98，AUCCT26 = 1.00)。这些数据显示了TAMPS在患者分层和评价免疫治疗结果方面的潜力。
TAMPS也可用于全肿瘤切片的显微镜检查，这是评估TIL的临床方法之一。对于4T1肿瘤切片，相对于未经处理的肿瘤切片的初始位置而言，经APD-L1/Oxa处理的切片中，TAMPM1和TAMPCTL的密度分别高出2倍和1.8倍，而在经APD-L1/Oxa处理的切片中，TAMPNE的密度仅为未经处理的切片的4.5倍。在CT26肿瘤组织切片中，TAMPM1和TAMPCTL的非均匀分布密度分别是未经处理的肿瘤切片的1.5和1.7倍，而TAMPNE的密度比未经处理的肿瘤切片低3.1倍。由于超过75%的TIL与TIL共定位，如免疫荧光染色所证实的，肿瘤中的TIL代表各自TIL的情况。此外，未经治疗的4T1和CT26肿瘤呈现出完全不同的免疫空间分布，这与先前的发现一致，即高免疫原性(CT26)肿瘤有高肿瘤抑制白细胞浸润，而低免疫原性(4T1)肿瘤有低肿瘤抑制白细胞浸润。
总结
TIL分子成像的一个基本挑战是设计能够将TIL与其他器官中驻留的白细胞区分开来的探针。作者的双锁定串联分子设计解决了这一挑战，该设计同时将疾病部位和生物标记物的特异性整合到探针的信号激活中。虽然双锁设计被证明可以改善癌症成像42-44，但它还没有被用于TIL的特异性检测。双锁定夯实仅在肿瘤和淋巴细胞生物标记物存在的情况下触发其荧光，因此在脂多糖诱导的炎症中特异性地检测到TIL，而没有来自其他白细胞的假阳性；相反，它们的单锁对应物未能做到这一点。串联设计是模块化的，可以推广到不同的TIL，如TAMPM1、TAMPCTL和TAMPNE的合成分别用于检测肿瘤浸润性M1巨噬细胞、CTL和中性粒细胞。这种夯实阵列使得能够实时分析TIL，提供了一种非侵入性的方法来准确地描绘出肿瘤内的免疫环境。此外，TAMPS对TIL具有高度的特异性和敏感性，在肿瘤切片的免疫荧光染色中，TAMPS与其各自的TIL显示出70%以上的重叠，并且它们的R- NIRF (R≥ 0.73- 0.74，ρ≥ 0.85)与通过流式细胞仪测量的TIL水平高度相关。TAMPs的这种实时分析能力也在其他治疗中得到验证，包括巨噬细胞和中性粒细胞靶向治疗。因此，TAMPS使作者能够准确地区分低免疫原性(4T1)和高免疫原性(CT26)肿瘤，并密切监测CTL的渗透、巨噬细胞的极化和中性粒细胞的变化，以及不同治疗的结果。
TAMPS对肾脏的高清除率和荧光开启反应为TIL的荧光尿液分析提供了一种方便的方法。与实时成像数据一致，排出的捣固物的尿R- ≥ 准确地反映了它们各自的TIL群体(R NIR 0.75，ρ ≥ 0.87)。基于TAMP的尿液分析使作者能够高精度地区分未经治疗的CT26肿瘤和未经治疗的4T1肿瘤，以及APDL1治疗的CT26肿瘤和APDL1治疗的4T1肿瘤(AUC = 1.00)。此外，在癌症免疫治疗的早期，TAMPS的尿R- ≥ 可预测终点的相对肿瘤体积，其中TAMPM1和ρ| ≥呈负相关(R ≥ 0.74，|ρ ≥ 0.86)，TAMPNE与相对肿瘤体积呈正相关(R NIR 0.89，RNIR 0.94)。除了尿液分析，TAMPS还通过显微镜检查描绘了TIL在整个肿瘤切片中的空间分布。TAMP染色显示治疗后TIL的位置和密度的变化，显示更多的预后TIL(M1巨噬细胞和CTL)阳性，较少的预后TIL(中性粒细胞)分布在肿瘤中心，M1巨噬细胞水平高1.5-2.0倍，CTL水平高1.6-1.9倍，中性粒细胞水平低3.1-4.5倍。
综上所述，作者开发了一套TIL特异性分子荧光探针(TAMPS)，用于肿瘤免疫治疗的辅助诊断和预后评估。TAMPS具有独特的双锁定传感机制，允许与TIL进行特定的荧光关联。基于TAMP的实时成像和尿液分析是非侵入性和动态的，可用于在侵袭性活检的静态流式细胞术分析水平上分析具有敏感性和特异性的多个TIL。TAMPS的信号相关性允许准确地分析肿瘤的免疫原性，并对时间的变化进行纵向监测。因此，TAMPS代表了一种高通量、非侵入性和有效的方法来筛选临床前环境中的联合免疫治疗药物，并为个性化联合癌症免疫治疗的患者分层、免疫治疗干预的优化和免疫治疗结果的预测保留了翻译潜力。TAMPS的模块化双锁串联设计可推广用于从目标疾病部位的靶细胞中特异性检测生物标记物。
参考文献
Activatable near-infrared probes for the detection of specific populations of tumour-infiltrating leukocytes in vivo and in urine. He, S., Cheng, P. & Pu, K. Nat. Biomed. Eng (2023). https://doi.org/10.1002/anie.202201541
